酵母一杂交和酵母二杂交|的区别是什么

的关键的区别在酵母一杂交和酵母二杂交之间那是杂交酵母吗在体外酵母二杂交是一种基于dna -蛋白质相互作用的分析方法在体外基于分析蛋白质-蛋白质相互作用。

研究细胞分子间的相互作用有助于确定参与基因表达和蛋白质通路的识别位点。DNA和蛋白质的相互作用是细胞过程中不可或缺的，如DNA修饰和转录调控等。另一方面，蛋白质和蛋白质的相互作用在细胞过程中发挥着重要作用，比如复制，转录、翻译信号转导。因此，通过不同的分析方法识别这些细胞分子的相互作用是至关重要的。酵母一杂交和酵母二杂交是两种在体外基于分析dna -蛋白质和蛋白质-蛋白质相互作用的分析。

内容

1.概述及关键区别
2.什么是酵母一杂交
3.什么是酵母二杂交
4.相似之处-酵母一杂交和酵母二杂交
5.酵母一杂交vs酵母二杂交在表格形式
6.摘要-酵母一杂交vs酵母二杂交

什么是酵母一杂交?

酵母一杂交(Y1H)是一种在体外基于分析细胞内dna -蛋白质相互作用。这种方法最早是由Wang和Reed在1993年建立的。从那时起，它在生物学研究中显示出更大的力量。在这项试验中，有两个主要成分:DNA诱饵和蛋白质猎物。

图01:酵母One Hybrid

在这个过程中，首先在两个不同的报告源(HIS3, LacZ)上游克隆一个DNA序列(DNA诱饵)。这些报告基因被整合到一个酵母菌株的基因组中。转录因子被当作蛋白质猎物。将转录因子与酵母Gal4转录因子的转录激活域(AD)融合，合成杂交蛋白。在引入酵母菌株之前，整个杂交蛋白被整合到质粒中。引入重组质粒后，当转录因子与DNA片段相互作用时，AD片段激活报告基因表达(his3或LacZ)。对质粒进行测序可以鉴定出能与DNA片段结合的转录因子。近年来，酵母一杂交法被用于疾病诊断的研究。因此，在未来，该方法将在科学研究和医学治疗中得到更广泛的应用。

什么是酵母二杂交?

酵母二杂交(Y2H)是一种在体外基于分析细胞内蛋白质和蛋白质相互作用。1989年，斯坦利·菲尔兹和宋玉圭发现了这种方法。这项技术利用酵母的Gal4转录因子来检测蛋白质之间的相互作用。

图02:酵母二杂交

在这种方法中，首先使用感兴趣的蛋白构建了两个融合(杂交):一个蛋白与DNA结合域(DBD)融合，另一个蛋白与Gal4转录因子的激活域(AD)融合。与DBD融合的蛋白质称为诱饵，与AD融合的蛋白质称为猎物。在酵母菌株中，当诱饵和猎物相互作用时，DBD和AD被拉近，在报告基因上游产生一个功能性的Gal4转录因子。功能性转录因子激活报告基因表达。此外，该方法目前被用于筛选哺乳动物细胞中整合膜蛋白的相互作用。