关键区别 - RAPD与RFLP
遗传标志物用于分子生物学中,以鉴定个体和物种之间的遗传变异。随机扩增多态性DNA(RAPD)和限制片段长度多态性(RFLP)是实验室通常使用的两个重要分子标记。RAPD用短而任意的寡核苷酸进行底漆,并且基于整个模板中多个位置的随机扩增脱氧核糖核酸有机体。RFLP具有特定的限制核酸内切酶,它是基于多态性由此产生的限制片段和杂交。RAPL和RFLP之间的关键区别在于RAPD是一种pcr没有先前的序列知识执行的技术然而RFLP不参与PCR,需要先前的序列知识来执行该技术。
内容
1。概述和关键差异
2。什么是Rapd
3。什么是RFLP
4。并排比较 - RAPD与RFLP
5。概括
什么是Rapd?
RAPD是分子生物学中有用的分子标记。这是一种快速简便的技术。RAPD可以定义为一种方法,该方法由于目标DNA模板的多个位置随机扩增而导致多态DNA序列。RAPD使用具有PCR扩增的任意序列的短寡核苷酸引物。没有先前的序列知识,可以人为地合成引物。因此,它被认为是一种简单且有用的技术。
RAPD涉及以下主要步骤。
- 提取靶DNA
- 使用随机选择的引物扩增靶DNA的多个位置
- 凝胶电泳放大的PCR产品
- 用溴化乙锭染色并鉴定多态性
由于引物退火的变化,在扩增过程中会产生不同长度的不同片段。因此,凝胶上的带状模式在个体和物种之间是不同的。因此,RAPD可以在鉴定和分化中检测生物体之间的遗传变异。
RAPD应用于分子生物学的各种研究,例如鉴定密切相关的物种,基因映射,DNA指纹,遗传性疾病的鉴定等之间的遗传差异等。
什么是RFLP?
限制片段长度多态性(RFLP)是用于鉴定同源DNA序列遗传变异的分子生物学中的分子标记。这是为DNA指纹识别开发的第一个遗传标记。当受到特定限制酶限制时,所有生物都会产生独特的DNA谱。RFLP是产生个体独特的DNA谱并检测遗传变异的重要工具。当DNA样品用特定的限制性核酸内切酶消化时,它会产生不同的DNA曲线,这些DNA轮廓是每个个体所独有的。因此,该方法的主要因素是通过限制具有特定限制酶的同源DNA来检测生物体之间的遗传变异,并通过凝胶电泳和印迹分析片段长度多态性。斑点模式是每个生物体所独有的,并表征了特定的基因型。
RFLP涉及以下步骤。
- 从样品中分离出足够量的DNA
- 具有特定限制性核酸内切酶的DNA样品的碎片分解为短序列
- 分离所得片段,长度不同琼脂糖凝胶电泳。
- 通过Southern印迹将凝胶曲线转移到膜中
- 膜与标记的探针的杂交以及对每个轮廓中片段长度多态性的分析
RFLP具有各种应用,例如诊断遗传疾病,基因组映射,法医研究中的犯罪鉴定,亲子鉴定等。
RAPD和RFLP有什么区别?
RAPD vs RFLP |
|
RAPD是基于随机引物和PCR的分子标记。 | RFLP是基于不同长度限制片段的产生的分子标记。 |
所需的样本 | |
小型DNA样品足以进行RAPD分析。 | RFLP分析需要大量提取的DNA样品。 |
时间 | |
RAPD是一个快速的过程。 | RFLP是一个耗时的过程。 |
底漆使用 | |
使用随机引物,可以将相同的引物用于不同的物种。 | 物种特异性探针用于RFLP进行杂交。 |
可靠性 | |
与RFLP相比,该技术的可靠性较小。 | RFLP是一种可靠的技术。 |
吸毒 | |
RAPD涉及南方墨。 | Southern印迹是RFLP的一步。 |
检测等位基因变异 | |
RAPD无法检测到等位基因变化。 | RFLP可以检测到等位基因变化。 |
需要序列知识 | |
RAPD不需要事先的序列知识。 | 探针设计需要先前的序列知识。 |
pcr | |
PCR参与RAPD | PCR不参与RFLP。 |
可重复性 | |
RAPD的可重复性低 | 与RAPD相比,RFLP具有很高的可重复性。 |
摘要 - RAPD与RFLP
RAPD和RFLP是分子生物学中使用的重要标记。两种方法都能够检测生物体之间的遗传变异。RAPD是使用随机引物进行的。使用特定限制酶进行RFLP。两种方法都产生了单个生物独有的DNA谱。RAPD比RFLP涉及的步骤相当几。但是,与RFLP相比,它产生的可靠和可重现结果较少。这是RAPD和RFLP之间的主要区别。
参考:
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2. Powell,Wayne,Michele Morgante,Chaz Andre,Michael Hanafey,Julie Vogel,Scott Tingey和Antoni Rafalski。“ RFLP,RAPD,AFLP的比较
图片提供:
1.(未知) - 国立卫生研究院(公共领域)的“ RFLP基因分型”下议院维基梅迪亚
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