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DAPI和Hoechst的区别是什么

2023年5月23日发布的Dr.Samanthi

的关键的区别在DAPI和Hoechst之间DAPI是一种用于染色固定细胞中DNA含量的染料,而Hoechst是一种用于染色活细胞中DNA含量的染料。

细胞周期的鉴别染色是一种非常重要的方法。它允许DNA和RNA染色,可以测定细胞中DNA或RNA的含量。反过来,这使得人们可以区分细胞周期的不同阶段,例如G(0), G(1)和细胞分化。有不同的染色剂用于细胞的鉴别染色。DAPI和Hoechst是两种用于细胞鉴别染色的染色剂。

内容

1.概述和主要区别
2.什么是DAPI
3.赫斯特是什么
4.相似之处——DAPI和Hoechst
5.表格形式的DAPI与Hoechst
6.总结- DAPI vs Hoechst

什么是DAPI?

DAPI是一种荧光染料。它与腺嘌呤以及DNA中富含胸腺嘧啶的区域。这种染色剂广泛用于荧光显微镜。这种染色剂也被称为DAPPY或4,6 -二氨基-2-苯基吲哚。由于DAPI可以穿过完整的细胞膜,因此可以用于染色细胞中的DNA含量。但其细胞通透性低,一般用于固定细胞中DNA含量的染色。DAPI被波长为358nm左右的紫外光激发,并在最大发射光谱为461nm左右发出蓝绿色荧光。

表格形式的DAPI与Hoechst

图01:DAPI

DAPI于1971年在埃尔兰根的Otto Dann实验室首次合成,作为抗锥虫病病。但作为一种药物,它并不成功。进一步的研究表明,它与DNA结合强烈,并在与DNA结合时变得更荧光。这导致了它在鉴定DNA含量方面的应用。第一次记录使用DAP1作为荧光DNA染色剂是在1975年鉴定线粒体DNA超速离心法。

此外,DAPI通常在其MSDS(材料安全数据表)中标记为无毒。无论如何,由于它是一种小的dna结合化合物,很可能有一些致癌作用。因此,在处理和处置DAPI污渍时应小心。

赫斯特是什么?

赫斯特是蓝色荧光染料家族的一员。它具有很高的细胞渗透性,因此可以用来检测活细胞的DNA含量。赫斯特是一种双苯并胺,是一种有机化合物。通常有三种相关的赫斯特染色用于DNA染色:赫斯特33258,赫斯特33342和赫斯特34580。然而,染料Hoechst 33258和Hoechst 33342是实验室中最常用的。此外,Hoechst 33258和Hoechst 33342具有相似的激发发射光谱。这两种染料都被波长为350纳米左右的紫外光激发。它们发出蓝绿色的荧光,最大发射光谱为461纳米。

DAPI和Hoechst -并排比较

图02:赫斯特

Hoechst有不同的应用:荧光显微镜和免疫组织化学、流式细胞术计数或分选细胞、细胞周期的鉴别染色、琼脂糖凝胶中存在RNA时检测DNA、自动DNA测定和染色体分选。此外,它们可以在细胞分裂过程中干扰DNA复制,因此它们具有潜在的致突变和致癌作用。因此,在处理和处置赫斯特污渍时应小心。

DAPI和Hoechst有什么相似之处?

  • DAPI和Hoechst是两种用于细胞鉴别染色的染色剂。
  • 它们是蓝色荧光染料。
  • 两种染色剂都倾向于与DNA中富含A/ t的区域结合。
  • 它们是轻微的林木束缚斑。
  • 使用相同的设备过滤器设置可以看到两种污渍。
  • 它们可能致癌。

DAPI和Hoechst的区别是什么?

DAPI是一种通常用于染色固定细胞中的DNA含量的染料,而Hoechst是一种通常用于染色活细胞中的DNA含量的染料。因此,这是DAPI和Hoechst之间的关键区别。DAPI细胞通透性低,而Hoechst细胞通透性高。

下面的信息图以表格形式展示了DAPI和Hoechst之间的差异,以便进行并排比较。

总结- DAPI vs Hoechst

DNA染色是测定细胞DNA含量的一个非常重要的方面。DAPI和Hoechst是两种用于细胞鉴别染色的蓝色荧光染料。这两种染色剂都用于荧光显微镜,它们是DNA中较小的林木结合染色剂。然而,DAPI由于其膜通透性低,通常用于固定细胞DNA含量的染色,而Hoechst由于其膜通透性高,通常用于活细胞DNA含量的染色。所以,这总结了DAPI和Hoechst之间的区别。

参考:

1.”Dapi.《概览| ScienceDirect Topics》。
2.Scharenberg, Christian W.等。ABCG2转运蛋白是一种高效的Hoechst 33342外排泵,并在未成熟人造血祖细胞中优先表达美国血液学会。

图片来源:

1.”38 f3-chknfh-dapi-shsy5y作者:gerrysshaw——自己的作品(cc by - sa4.0)via Commons Wikimedia
2.”赫斯特染料的结构由Crenim -自己的作品(CC0)通过共享维基媒体

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了下:分子生物学

作者简介:Dr.Samanthi

samanthi Udayangani博士拥有植物科学学士学位、分子与应用微生物学硕士学位和应用微生物学博士学位。她的研究兴趣包括生物肥料,植物与微生物的相互作用,分子微生物学,土壤真菌和真菌生态学。

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