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比色测定法和荧光测定之间有什么区别

2021年7月28日发表Samanthi博士

这关键区别在比色测定法和荧光测定之间是比色测定法确定溶液中有色化合物的浓度,而荧光测定法确定了溶液的动力学机制。

一个生化测定是一种检测或量化生物分子或物质的活性的技术。它是一个体外过程。比色测定法和荧光测定是在实验室中进行的两种常见的生化测定。多种技术,例如Elisa和蛋白质印迹也是定量代谢活性和生物分子(例如蛋白质,酶和其他小分子)功能行为的复杂生化测定。这些类型的测定法用于鉴定蛋白-DNA,蛋白-RNA和蛋白质 - 蛋白质相互作用。

内容

1。概述和关键差异
2。什么是比色测定法
3。什么是荧光测定法
4。相似性 - 比色法和荧光测定法
5。比色与荧光测定表格形式
6。概括

什么是比色测定法?

比色测定法是确定溶液中有色化合物浓度的技术。换句话说,比色测定是一种反应,由于试剂和分析物之间的酶促或化学反应导致颜色变化。比色测定在生物化学中实践以测试酶,特定化合物,激素,抗体和其他分析物。他们使用比色器或分光光度计。比色器是表征彩色样品的仪器,以便提供颜色特征的客观度量。分光光度计是一种测量光强度与光的颜色或波长的函数的设备。

比色与荧光测定法

图01:比色测定法

比色测定如何起作用?

在比色测定法中,制备了与井结合的特定抗体。然后添加样品。这可能使样品与抗体结合。然后将检测抗体和底物添加到孔中,以与检测探针反应。在阅读之前,在末尾添加了停止解决方案。一个空白的空白井留在没有样品的情况下。在比色测定中,颜色越深,分析物浓度越大。通常,读取只需要一个波长。但是,如果有参考测量,则使用两个或更多波长。

什么是荧光测定法?

荧光测定是一种确定酶反应动力学机制的技术。荧光测定法发生在非荧光底物或反之亦然。该测定还利用荧光共振能量转移(FRET),其中酶促反应改变了两个的位置荧光团因此,在底物中,改变荧光强度。

比较比色法和荧光测定法

图02:荧光测定法

荧光测定通常比其他测定法更敏感。由于其较高的敏感性,组织,细胞或患者流体样品的诊断酶估计值增加。

荧光测定方法如何工作?

在荧光测定法中,将底物添加到板中的样品中,并使用板读取器采取荧光响应。在这里,每个细胞分别测量。不透明板用于荧光测定法。这减少了光的散射。对于这种类型的测定,需要两个波长。一个波长是检测激发,另一个波长用于发射。

比色测定法和荧光测定法之间有什么相似之处?

  • 比色测定法和荧光测定是两种类型的生化测定。
  • 两种测定都用于医学诊断。
  • 这些测定涉及酶促反应。
  • 两种测定都涉及底物和分析物。

比色测定法和荧光测定有什么区别?

比色测定是一种确定溶液中有色化合物浓度的技术,而荧光测定是一种确定酶反应动力学机理的技术。因此,这是比色测定法和荧光测定之间的关键区别。此外,荧光测定比比色测定法更敏感。因此,荧光测定能够检测更多分析物。因此,这是比色测定法和荧光测定之间的另一个重要区别。此外,荧光测定需要两个波长,而比色测定法进行一个波长进行。

以下信息图表列出了比色测定法和荧光测定法之间的更多差异。

摘要 - 比色与荧光测定法

生化测定是一种用于确定和量化细胞代谢反应的分析过程。比色测定法和荧光测定是两种类型的生化测定。比色测定是一种反应,由于试剂和分析物之间的酶促或化学反应导致颜色变化,而荧光测定是一种用于确定酶反应动力学机制的技术。两种测定都取决于涉及底物和分析物的酶促反应。荧光测定比比色测定更敏感。最重要的是,荧光测定需要两个波长,而比色测定只能使用一个波长进行。因此,这总结了比色测定法和荧光测定之间的差异。

参考:

1.“”比色测定法。”实验生物科学。
2.“”荧光酶测定。”创意酶。

图片提供:

1.“”比色测定法“ 经过Sepehr Ehsani(CC BY-NC-ND 2.0)通过Flickr
2.“”荧光计” Matthias M. - 自己的作品(CC由3.0)通过Commons Wikimedia

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提交以下:生物化学

关于作者:Samanthi博士

Samanthi Udayangani博士拥有B.Sc.植物科学学位,硕士在分子和应用微生物学中以及应用微生物学中的博士学位。她的研究兴趣包括生物肥料,植物 - 微生物相互作用,分子微生物学,土壤真菌和真菌生态学。

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