细胞原代培养与继代培养的区别

关键区别:原代细胞培养与继代细胞培养

在讨论原代细胞培养和继代细胞培养的区别之前，让我们先简单地定义一下什么是细胞培养。细胞培养是去除的过程细胞从动物或植物及其在人为控制的环境中生长而来。细胞可以直接从组织中取出，用酶解或机械方法分解，也可以从已经建立的培养物中提取。初级细胞培养和二级细胞培养的关键区别在于原代细胞培养的细胞直接从动物或植物组织中获得,而用于继代细胞培养的细胞是从已经建立的原代培养中获得的。因此，次文化是一种源于原文化的新文化。

让我们进一步探讨细胞培养的原代和继代的意义，以便更好地区分它们。

什么是原代细胞培养?

原代细胞培养是通过酶促或机械措施使细胞与亲本动物或植物组织分离，并在受控的环境条件下，在玻璃或塑料容器中适当的基质中保持细胞的生长。原代培养的细胞具有相同的核型(数目和外观染色体在核的真核细胞)作为原始组织中的细胞。原代细胞培养可根据培养细胞的种类分为两类。

• 依赖于锚固或贴壁细胞-这些细胞需要附着生长。贴壁细胞通常来源于组织器官，比如肾脏的细胞是固定的，嵌在里面结缔组织．

• 独立或悬浮细胞锚固-这些细胞生长不需要附着。换句话说，这些细胞不附着在培养容器的表面。所有的悬浮培养物都来自血液系统的细胞;例如，白细胞淋巴细胞悬浮在等离子体中。

原代培养的细胞寿命有限。由于几个原因，牢房不能无限期关押。原代培养细胞数量的增加会导致基质和营养物质的耗尽。同时，细胞活动会逐渐增加毒性水平代谢物在培养中抑制细胞进一步生长。

在这一阶段，必须进行二次培养或继代培养，以确保细胞持续生长。

什么是二次细胞培养?

如上所述，当贴壁培养的细胞占据了所有可用的底物，或当悬浮培养的细胞超过了培养基支持进一步生长的能力时，细胞增殖开始减少或完全停止。为了保持最佳的细胞密度以继续生长和刺激进一步的增殖，原代培养必须进行继代培养。这个过程被称为辅助细胞培养．

在继代细胞培养过程中，原代培养的细胞被转移到带有新鲜生长介质的新容器中。这个过程包括在贴壁原代培养中去除之前的培养基和分离贴壁细胞。细胞二次培养是定期需要为细胞提供生长空间和新鲜营养，从而延长细胞的寿命和扩大培养细胞的数量。

将一定体积的原代培养物放入等量的新鲜培养基中，可使细胞系长期保持。如在工业过程或科学实验中，在更大体积的新鲜培养基中进行二次培养以增加细胞的数量。

原代细胞培养和继代细胞培养有什么区别?

由于我们现在已经分别理解了这两个术语，我们将两者进行比较，以便找到它们之间的其他差异。

何时使用原代和/或二次细胞培养

这取决于你想要学习什么以及你要做什么类型的实验。

基本的细胞培养:这是用于从亲本组织中培养细胞的过程。原代培养的细胞将有一个有限的寿命由于底物和营养物质的耗尽和毒素的积累，随着人口的增长。原代培养，尽管在分离过程中使用了分离技术，可能包含几种类型的细胞。然而，在所有类型的实验中，这可能不是一个问题，在这种情况下，可以单独使用初级培养。

辅助细胞培养:通常在实验中，原代培养获得的细胞数量不足。二次细胞培养为扩大细胞数量和延长寿命提供了机会。它可以利用选择性培养基对细胞进行进一步的选择基因型和表型种群的一致性。该过程用于产生用于基本表征、保存和实验的复制培养物。

与亲本组织的相似性

基本的细胞培养:原代细胞培养的细胞直接从动物或植物组织中获得。因此，原代培养的细胞与其亲本组织非常相似，相应地，生物反应可能比继代培养的细胞更接近体内情况。

辅助细胞培养:继代细胞培养来源于原代细胞培养。虽然继代培养可以延长细胞的寿命，但也有可能经过几个阶段后，细胞会发生转变或失去控制，不能分裂超过一定的时间。这可能是因为突变或者在传代培养过程中原代细胞的基因改变。例如，一些微生物倾向于通过改变其生物学特性来适应与自然环境不同的培养条件。

培养过程-获得细胞

基本的细胞培养:在原代细胞培养中，动物或植物组织将经历冲洗、解剖、机械或酶解等阶段。分解的组织将包含各种不同类型的细胞，这可能需要采用分离技术来分离感兴趣的细胞。

辅助细胞培养:在细胞的二次培养中，如果原代培养是贴壁培养，第一步是用机械或酶的方法将细胞从贴壁(培养容器表面)上分离。然后，这些细胞必须彼此分离，形成单细胞悬浮液。

培养中的细胞数量

基本的细胞培养:绝对的单细胞悬浮是不可取的，因为许多初级细胞在小簇中可以更好地生存。

辅助细胞培养:这足以产生一个单细胞悬浮液。

文化的寿命

基本的细胞培养:原代细胞培养物的寿命有限。如上所述，这是因为细胞的生长消耗底物和营养物质，导致有毒代谢物的积累。结果，细胞的生长速度逐渐下降，导致细胞死亡。

辅助细胞培养:二次细胞培养可以延长细胞的寿命。周期性的传代培养可以通过原代细胞的转化或遗传改变产生不朽的细胞。

污染的风险

基本的细胞培养:原代细胞培养比较难处理。一般来说，原代细胞培养需要丰富的混合氨基酸，微量元素,某些激素和生长因子。因此，原代细胞培养的污染风险高于继代细胞培养。

辅助细胞培养:二次细胞培养相对容易维持，污染的风险比原代细胞培养低。

在这篇文章中，我们试图理解术语原代细胞培养和继代细胞培养，然后比较突出它们之间的关键区别。最基本的区别在于细胞是如何从培养中获得的;初级细胞培养的细胞直接从动物或植物组织中获得，而次级细胞培养的细胞从已经建立的初级培养中获得。

引用:

细胞培养基础-手册由Invitrogen和Gibco

弗莱什尼(2006)。细胞培养的基本原理。肿瘤和应用药理学中心。

图片来源:

Umberto Salvagnin的《细胞培养》2.0 (CC)通过Flickr