这关键区别在常规嵌套和实时PCR分析之间是传统的PCR是一种开发用于扩增DNA和嵌套PCR的特定序列的技术，是传统PCR的修饰，由两个顺序扩增反应组成，而实时PCR是常规PCR的变体，能够量化扩增的产物的量化。。
PCR是一种非常常见的科学技术，在研究和医学中广泛用于检测DNA。PCR测试用于检测抗原的检测DNA或RNA。通常，在检测抗体或表现出疾病症状之前，体内存在病毒RNA。PCR测试可以说明某人是否早期患有病毒。目前，PCR是检测的标准测试新冠肺炎疾病。有不同类型的PCR技术，例如实时PCR，嵌套PCR，多重PCR，热启动PCR和远程PCR等。
内容
1。概述和关键差异
2。什么是常规的PCR分析
3。什么是嵌套的PCR分析
4。什么是实时PCR分析
5。相似性 - 常规嵌套和实时PCR分析
6。常规与嵌套与实时PCR分析的表格形式
7。摘要 - 传统与嵌套与实时PCR分析
什么是常规的PCR分析？
常规PCR分析是体外DNA扩增技术通常在分子生物实验室中进行。该方法使得能够生产数千至数百万个特定DNA片段的副本。卡里·穆利斯（Kary Mullis）在1980年引入了这一技术。该技术需要一个称为模板的DNA片段才能制作许多副本。TAQ聚合酶用作DNA聚合酶酶的工作，并催化模板序列的新链的合成。
PCR混合物中的底漆将作为片段扩展的起点。PCR混合物中包括制作DNA拷贝所需的所有成分。PCR反应在PCR机器中进行，并应使用正确的PCR混合物和正确的PCR程序喂食。如果反应混合物和程序是正确的，则将从非常少量的DNA中产生DNA的特定部分的所需数量。
图01：常规PCR分析
PCR反应涉及三个主要步骤：变性，底漆退火和链延伸。这三个步骤在三个不同的温度下发生。PCR缓冲液保持TAQ聚合酶作用的最佳条件。重复PCR反应的这三个阶段，以产生所需量的PCR产物。在每个PCR反应中，DNA的数量副本会加倍。因此，可以在PCR中观察到指数扩增。PCR产品可以使用凝胶电泳由于它在凝胶上产生可见量的DNA，并且可以纯化用于进一步的研究，例如测序。
PCR是医学和生物学研究中的宝贵工具。尤其是在法医研究中，PCR具有巨大的价值，因为它可以扩增DNA，以从犯罪分子的微小样本中进行研究并制作法医DNA谱。PCR广泛用于分子生物学的许多领域，包括基因分型，基因克隆，突变检测，DNA测序，DNA微阵列和亲子关系测试。
什么是嵌套的PCR分析？
嵌套PCR是一种降低DNA的非特异性扩增的PCR。嵌套PCR分析中有两个连续的PCR或两个顺序扩增反应。在第一个扩增反应期间，产生PCR产物。第一个反应后，对第一反应的PCR产物进行了第二个扩增反应。因此，第二个反应混合物中的底漆与第一个PCR产物结合并放大。
图02：嵌套PCR
底漆对在每个反应中都是不同的。嵌套PCR中引物的非特异性结合降低。嵌套的PCR分析对于提高灵敏度和/或特异性很有用。但是，嵌套的PCR需要有关感兴趣的序列的知识。
什么是实时PCR分析？
实时PCR或定量PCR（Q PCR）是PCR的修改版本，可定量测量PCR产品。因此，该技术使用实时PCR机器实时量化扩增。它也是确定样品中存在的目标序列或基因的量的合适方法。
实时PCR的有趣特征是，它将放大和真实量化结合到一个步骤中。因此，实时PCR技术可以消除对凝胶电泳检测的需求。在PCR反应期间，使用荧光染料标记PCR产物，最终将导致直接定量。当累积PCR产品时，也会积累荧光信号，并将通过实时机器进行测量。SYBR Green和Taqman是检测或观察实时PCR扩增过程的两种方法。两种方法都监测放大过程的进度，并实时报告产品的数量。
图03：实时PCR
实时PCR具有多种应用，例如基因表达定量，microRNA和非编码RNA分析，SNP基因分型，拷贝数变异的检测，罕见突变的检测，遗传修饰的生物的检测以及传染剂的检测。
常规嵌套和实时PCR分析之间有什么相似之处？
- 嵌套和实时PCR分析是常规PCR分析的修改。
- 这三种技术都放大了DNA样品。
- 他们的产品可用于测序或分析。
- 这些测定需要底漆。
常规嵌套和实时PCR分析有什么区别？
常规PCR是一种用于扩增DNA的特定序列的技术。同时，嵌套PCR是传统PCR的修改，由两个顺序扩增反应组成，实时PCR是传统PCR的变体，能够量化扩增的产物。因此，这是常规嵌套和实时PCR分析之间的关键区别。与常规和实时PCR不同，嵌套PCR使用两个引物集。此外，嵌套PCR中有两个连续的扩增反应，以减少非特异性扩增。此外，常规和实时PCR分析不包含两个顺序扩增反应。
以下信息图列出了以表格形式进行表面比较的常规嵌套和实时PCR分析之间的差异。
摘要 - 传统与嵌套与实时PCR分析
常规PCR是开发用于扩增DNA特定片段的第一种技术。嵌套的PCR和实时PCR是常规PCR的两个变体。有两个顺序扩增反应，并在嵌套PCR中使用两个引物集。开发实时PCR来量化放大的PCR产品。因此，这总结了常规嵌套和实时PCR分析之间的差异。
参考：
1.格林先生，桑布鲁克J.嵌套聚合酶链反应（PCR）。”冷春港协议，美国国家医学图书馆。
2.“”实时聚合酶链反应。”概述|ScienceDirect主题。
图片提供：
1.“”聚合酶链反应”恩佐洛普（Enzoklop） - 自己的作品（CC BY-SA 3.0）通过Commons Wikimedia
2.“”嵌套的PCR” Zephyris在英语Wikipedia上（CC BY-SA 3.0）通过Commons Wikimedia
3.“”实时PCR”İnformatic - 自己的工作（CC BY-SA 3.0）通过Commons Wikimedia
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