键差-向前vs反向引物
聚合酶链反应(PCR)是一种用于分子生物学应用的DNA扩增方法。这是一种常用的技术,可以制作数百万到数十亿份特别感兴趣的副本DNA序列.它是一个在体外方法在实验室进行。PCR技术完全依赖于商业化生产DNA聚合酶叫做Taq聚合酶.它还需要其他几个部件和适当的温度维护。一个重要的组成部分是引物。引物是专门为目标DNA序列设计的短DNA序列。他们通常在20岁左右核苷酸在长度。Taq聚合酶催化将核苷酸添加到先前存在的核苷酸序列中。因此,引物是合成新链的起始点。Taq聚合酶仅在5 '到3 '方向上起作用,因此DNA合成发生在相同的5 '到3 '方向上。由于DNA是双链的,PCR需要两种引物。它们被称为正向引物和反向引物。当DNA合成发生时,根据引物在DNA中的延伸方向来命名正向和反向引物。正向底漆与底漆退火反义DNA并启动+ve链的合成基因5 '到3 '方向。反向底漆与底漆退火有义链并启动了互补链的合成编码链;哪个是- 5 '到3 '方向的基因链.这是关键的区别正反引物之间。
内容
1.概述和主要区别
2.什么是正向引语
3.什么是反向底漆
4.正反引物的相似之处
5.并排比较-表格形式的正向与反向引物
6.总结
什么是正向引语?
正向定向是基因编码链或感觉链的合成。Taq聚合酶催化合成5′~ 3′方向的新链。编码链的合成发生在引物与非编码链或反义链相互退火并沿5′~ 3′方向伸长的过程中。
与反义链、非编码链或模板链退火的引物称为正向引物,因为正向引物是基因编码链或正链合成的起点。正向引物具有短核苷酸序列,与反义链的3 '侧端互补。它与反义链杂交,并促进Taq聚合酶添加与模板链互补的核苷酸。
什么是反向底漆?
反向引物是指与感应链或编码链的3′端相结合的DNA短序列。反向引物是合成编码序列或非编码序列的互补链的起点。反向引物被设计成与编码链的3 '端互补。因此,它与编码链的侧翼3 '端退火,并允许Taq聚合酶合成反义链或模板链。由于其取向相反,因此该引物被标记为反向引物。
反向引物和正向引物对于产生数百万到数十亿个目标或感兴趣的特定DNA区域的拷贝都很重要。
正向引物和反向引物有什么相似之处?
- 正向和反向引物都是由寡核苷酸.
- 正向引物和反向引物都具有与DNA双链两侧互补的短核苷酸序列。
- 正向引物和反向引物通常由20个核苷酸组成。
- 正向引物和反向引物都用于聚合酶链反应。
- 正向引物和反向引物都是商业化合成的。
- 正向引物和反向引物都是温度稳定的,它们通常具有相似的Tm。
- 正向引物和反向引物都用目标DNA序列退火。
- 根据PCR反应设计正向引物和反向引物。
- 正向引物和反向引物都是DNA扩增的起始点。
- 反向引物和正向引物对于产生目标或感兴趣的DNA序列的特定区域的百万拷贝都很重要。
正向引物和反向引物有什么区别?
正向引物vs反向引物 |
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正向引物是与基因非编码链或模板链3′端杂交的短DNA序列,是合成编码序列的起点。 | 反向引物是与编码链或非模板链3′端杂交的短DNA序列,是合成非编码序列的起点。 |
退火链 | |
向前引物退火与模板链。 | 反向引物与非模板链退火。 |
产生的新序列 | |
正向引物有利于编码序列的合成。 | 反向引物有利于非编码序列的合成。 |
摘要-展望vs反向引物
PCR技术涉及两种引物。它们是正向和反向引物。根据引物在新DNA链合成中的延伸率,这些引物被标记或命名。Taq聚合酶在5′到3′方向上合成新的DNA。因此,引物被设计为与双链的3 '端互补。正向引物沿5′~ 3′方向伸长,与反义、模板或非编码序列的3′端杂交。它是合成编码序列的起点。反向引物沿5′~ 3′方向伸长,与编码链、非模板链或义链的3′端杂交。它作为合成非编码序列的起点。这就是正向引物和反向引物的区别。
参考:
1.“Primer(分子生物学)”。维基百科,维基媒体基金会,2018年2月20日。可以在这里
2.“聚合酶链反应(PCR)。”可汗学院。可以在这里
图片来源:
1.《primer RevComp melted2》作者:Richard Wheeler (Zephyris)——个人作品,(cc by - sa3.0)通过下议院维基
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