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布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法

2019年3月19日发表Samanthi博士

这关键区别在布拉德福德和洛瑞蛋白质测定之间Bradford蛋白质测定基于染料Coomassie亮蓝色G-250的吸光度转移,而Lowry蛋白质分析基于铜离子(Cu+)离子的反应。氧化的肽键带有叶– ciocalteu试剂。

一个测定是一种分析技术,有助于表征样品的主要功能成分。因此,测定可能是定性测试或定量测试。许多领域的许多领域,包括实验室医学,药理学,环境生物学,分子生物学,生物化学和免疫学常规使用这种测定。Bradford和Lowry蛋白质测定是两个生化测定,这些测定确定样品溶液中的蛋白质浓度。两种测定法使用比色提供结果的技术。

内容

1。概述和关键差异
2。什么是布拉德福德蛋白质测定法
3。什么是Lowry蛋白质测定
4。布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法
5。并排比较 - 布拉德福德vs lowry蛋白质分析以表格形式
6。概括

什么是布拉德福德蛋白质测定法?

Bradford蛋白质测定是用于蛋白质分析的快速光谱分析程序。在测量溶液中的蛋白质浓度时,它显示出很高的精度。马里恩·布拉德福德(Marion Bradford)于1976年引入了此过程。在该测定中,总反应基于测量的蛋白质的氨基酸组成。换句话说,布拉德福德蛋白质测定是比色测定法。它使用染料coomassie亮蓝色。因此,该比色蛋白测定取决于染料的吸光度转移。Coomassie亮蓝色G-250以三种格式存在:阳离子(红色),阴离子(蓝色)和中性(绿色)。在酸性条件下,染料的红色形式转化为蓝色。它证实了蛋白质的结合。如果不存在蛋白质,则该溶液可能保持棕色。

布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法

图01:布拉德福德蛋白质测定法

Bradford蛋白质测定与其他蛋白质测定不同,因为它不太容易受到蛋白质溶液中存在的各种化合物的干扰。这些化合物包括钠,钾,葡萄糖和蔗糖等。

什么是Lowry蛋白质测定?

Lowry蛋白质测定是一种生化测定,用于确定溶液中蛋白质的总蛋白质水平。Oliver H. Lowry是1940年开发该试剂的人。该过程描述了与溶液中蛋白质浓度成正比的颜色变化溶液的总蛋白质浓度。因此,这也是比色蛋白测定法。

通过肽键的氧化和Folin -Ciocalteu试剂产生的铜离子(CU+)之间的反应是该程序的基础。同样,该试剂含有磷酸氢二酸和磷酸丁香酸。然而,洛里蛋白测定的反应机理尚不清楚。但这涉及通过减少叶核酸试剂的氧化,色氨酸和酪氨酸残基的氧化。

关键区别 - 布拉德福德vs洛里蛋白质测定法

图02:Lowry蛋白质测定

这半胱氨酸残基有助于在Lowry蛋白质测定中观察到的吸光度,并且反应导致鲜艳的蓝色分子。杂钼蓝。通过660nm的吸光度测量该分子的还原。因此,降低了叶藻藻试剂的半胱氨酸和色氨酸残基的浓度可推断溶液中蛋白质的总浓度。

布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法之间有什么相似之处?

  • Bradford和Lowry蛋白质测定确定溶液中的蛋白质浓度。
  • 两种方法都是颜色法。
  • 同样,两种方法的灵敏度都很高。

布拉德福德和洛瑞蛋白质分析有什么区别?

Bradford和Lowry蛋白质测定是确定溶液中蛋白质浓度的两种类型的测定。Bradford蛋白质测定取决于染料coomassie亮蓝色G-250的吸光度转移,而洛瑞蛋白质测定取决于肽键与叶菌粘结剂的氧化产生的铜离子的反应,以及叶二含氧量试剂。因此,这是布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法之间的主要区别。Bradford蛋白质测定需要15分钟才能产生结果,而Lowery蛋白质分析需要40-60分钟才能产生结果。因此,这是布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法之间的另一个区别。此外,Bradford蛋白质测定取决于氨基酸组成,而Lowry蛋白质测定部分取决于氨基酸组成。因此,这也是布拉德福德和洛瑞蛋白质测定法之间的差异。

下面的信息图提供了有关布拉德福德和洛瑞蛋白质分析之间差异的更多详细信息。

布拉德福德和洛瑞蛋白质测定 - 表格形式之间的差异

摘要 - 布拉德福德vs洛瑞蛋白质测定法

测定是一种用于表征样品主要功能成分的分析技术。Bradford和Lowry蛋白质测定是在比色技术下起作用的两种类型的蛋白质测定。Bradford和Lowry蛋白质分析都决定了溶液中的蛋白质浓度。然而,布拉德福德和洛瑞蛋白质测定之间的主要区别在于它们使用的比色技术。Bradford蛋白质测定法使用COOMASSIE亮蓝色G-250,而Lowry蛋白质测定法使用铜离子(Cu+)离子和叶藻藻类试剂。此外,Bradford方法比Lowry蛋白质分析得出快速的结果。但是,这两种方法都是高度敏感的方法,并且受到各种物质的干扰。

参考:

1.“加拿大植物学杂志。”加拿大植物学杂志 - 60(7):1046 - PDF,在这里可用。
2.“蛋白质测定的化学。”Thermo Fisher Scientific - 美国,在这里可用。

图片提供:

1. Helito的“ Bradford蛋白质分析” - 自己的作品(CC BY-SA 4.0)通过下议院维基梅迪亚

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提交以下:生物化学

关于作者:Samanthi博士

Samanthi Udayangani博士拥有B.Sc.植物科学学位,硕士在分子和应用微生物学和应用微生物学中的博士学位。她的研究兴趣包括生物肥料,植物 - 微生物相互作用,分子微生物学,土壤真菌和真菌生态学。

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